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更新時間：2021-06-03
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polyplus-transfection JETPEI-巨噬細胞轉染說明書
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| 試劑 | JETPEI ® -巨噬細胞 |
|---|---|
| 分子交付 | 脫氧核糖核酸 |
| 應用 | 原代巨噬細胞、神經膠質和樹突細胞的 DNA 轉染 |
| 細胞類型 | 原代巨噬細胞、膠質細胞和樹突細胞 |
| 轉染次數 | 0.5 ml jetPEI ® -巨噬細胞轉染試劑足以在 24 孔板中進行多達 500 次轉染或在 60 毫米培養皿中進行 160 次轉染 |
| 貯存 | 5°C ± 3°C，長達 12 個月 |
| 提供 | 150 毫米氯化鈉 |
jetPEI®-巨噬細胞轉染被認為難以轉染的原代巨噬細胞、神經膠質和樹突細胞。它含有甘露糖偶聯的線性聚乙烯亞胺，可與表達甘露糖特異性膜受體的細胞（如巨噬細胞）結合。
jetPEI®-Macrophage 也是轉染細胞系（如 RAW 264.7）的試劑。
jetPEI®-Macrophage 是一種含甘露糖的線性聚乙烯亞胺，旨在增強在細胞膜上表達甘露糖受體的細胞的轉染。細胞靶向是甘露糖殘基與特定細胞表面受體結合導致 DNA 復合物內化的結果。
| 參考編號 | 試劑量 | 氯化鈉的量 |
|---|---|---|
| 103-05N | 0.5 毫升 | 50毫升 |
JETPEI ® -巨噬細胞使巨噬細胞的轉染成功從熟化7天在GM-CSF（圖1）的存在的單核細胞衍生的。
圖 1：用jetPEI ® -巨噬細胞轉染人類巨噬細胞。使用jetPEI ® -巨噬細胞轉染后表達β-半乳糖苷酶的人巨噬細胞。
當用jetPEI ® -巨噬細胞轉染時，原代人類巨噬細胞和鼠 RAW 264.7 細胞表達顯著更高的蛋白質水平（圖 2）。
圖 2：jetPEI ® -Macrophage 與 jetPEI ®在 24 孔板中對原代人巨噬細胞和鼠 RAW 264.7 細胞的效率比較。在存在 100 U/ml GM-CSF 和 10% 血清的情況下，使用 1 µg pCMVLuc 和 2 µl 轉染試劑轉染原代人巨噬細胞。使用 2 µg pCMVLuc 和 6.4 µl 轉染試劑轉染鼠 RAW 264.7 細胞。轉染后24小時測量熒光素酶活性。
所述JETPEI ®細胞-巨噬協議是那么簡單，JETPEI ®之一：混合與試劑反應以形成復合物，并簡單地將混合物加入到細胞中的DNA。JETPEI ® -巨噬細胞是與血清和抗生素兼容，因此消除了對媒體改變的需要。在轉染后 24 小時至 72 小時確定蛋白質表達。
JETPEI ® -巨噬細胞非常適合于質粒遞送（DNA，shRNA或miRNA的），以表達細胞特異性甘露糖的膜受體，如原發性巨噬細胞，神經膠質和樹突狀細胞。
每一批jetPEI ® -巨噬細胞都在轉染試驗中進行測試。通常，在CMV啟動子控制下的螢火蟲熒光素酶基因的轉染產生10 9 RLU（相對光單位）/mg蛋白質。每個批次的值都在分析證書上注明。
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